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產品名稱:小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯免疫elisa試劑盒規格
英文名稱: Hsp-20 ELISA Kit
規格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。
小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯免疫elisa試劑盒規格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯免疫elisa試劑盒規格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯免疫elisa試劑盒規格技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
STK0 重組人 STK0 / LOK 蛋白 (His 標簽) STK0
ALDHA 重組人 ALDH / ALDHA / ALDC 蛋白 (His 標簽) ALDHA
CD68 重組人 CD68 / Macrosialin / Gp0 蛋白 (His & Fc 標簽) CD68
GBA3 重組人 GBA3 / CBGL 蛋白 (His 標簽) GBA3
CSNKG 重組人 CSNKG / CKI-gamma 蛋白 (His & GST 標簽) CSNKG
ALCAM 重組人 ALCAM / CD66 蛋白 (His 標簽) ALCAM
HYOU 重組人 ORP50 / HYOU / HSP2A 蛋白 (His 標簽) HYOU
SIRPA 重組人 SIRP alpha / CD72a 蛋白 (His 標簽) SIRPA
PVRL 重組人 CD / Nectin- / PVRL 蛋白 (His 標簽) PVRL
PVRL 重組人 CD / Nectin- / PVRL 蛋白 (Fc 標簽) PVRL
SEMA5A 重組人 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 (His 標簽) SEMA5A
CD5L 重組人 CD5L / API6 蛋白 (His 標簽) CD5L
CD244 重組人 2B4 / SLAMF / CD244 蛋白 (His 標簽) CD24422-0420-5 JC-0 5mg
70302-00 一步離心式石蠟清除劑 00 次
前列上皮細胞生長因子 5mL
丙烯葡聚糖凝膠 S-200 HR 50mL
動物 RNAout(TRIzol) 250mL
T4 聚核苷酸激酶 200U
20902-200 人 NK 細胞分離液 .062 200mL
8092- 96 孔板病毒 DNAout( 離心法 ) 次
ROX 參考染料 II 00μL
赤蘚紅 B 二鹽 5g
RNase-free Tris HCl,M,pH 6.5 00mL
人白細胞分離液 .078 200mL
8-0340-00 過氧化氫酶測試盒 ( 可見光比色法 ) 00 T
002-2500 TAE 電泳液 ,50× 2500mL
小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯免疫elisa試劑盒規格山羊抗大鼠 IgG(H+L),堿性磷酸酶標記 00μL
DNA CTAB( 十六烷基*基 ) 00g
RNA Tris Base( 三羥甲基氨基甲烷 ) 00g
AG 菌種 mL
00209-800 Bst DNA 聚合酶,大片段 800U
00873-00 電泳尿素 00g
T3 體外轉錄試劑盒 50 次
蛋白胨 250g