產(chǎn)品展示
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產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格 |
柱式 miRNA PAGE 膠回收試劑盒50 次說明書 | 50 次 | 來電可享受優(yōu)惠 |
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注意事項:
柱式 miRNA PAGE 膠回收試劑盒50 次說明書● 溶液PE *次使用前請按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無水乙醇,即5 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴(yán)格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點的Agarose 等。
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當(dāng)延長電泳時間,在條帶分離清晰后進行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會偏低。
● 溶液Eluent(0 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 片段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會影響后續(xù)試驗。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的片段。
● 請嚴(yán)格按照操作步驟操作。
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
柱式 miRNA PAGE 膠回收試劑盒50 次說明書答:回收得到的DNA 片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在.7-.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會偏低,因為pH 值和離子存在會影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時應(yīng)注意哪些問題?
答:柱式 miRNA PAGE 膠回收試劑盒50 次說明書當(dāng)DNA 片段長度較長(5 kb 以上)時,回收效率會有所下降,這是DNA 切膠回收時的常見現(xiàn)象。此時建議按以下方法解決問題:
適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點樣量;
2 由于長片段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對長片段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。
利卡靈-B : 5020-87-2 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
巨大戟醇 : 30220-46-3 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
白頭翁素;Anemonin : 9092--2 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 CAS 7697-59- 5235-078 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.g
七葉皂苷 IIa;Escin IIa : 規(guī)格: 0mg 訂購|咨詢
CAS 訂購|咨詢 規(guī)格: 40mg
多舌飛蓬苷 CAS 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
番瀉葉 CAS 訂購|咨詢 規(guī)格: 0.5g
知母皂苷BII CAS 36656-07-0 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
人參皂苷Rk CAS 訂購|咨詢 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支;
甾醇 CAS 57-87-4 訂購|咨詢 規(guī)格: 20mg
柱式 miRNA PAGE 膠回收試劑盒50 次說明書骨調(diào)蛋白(OMD)elisa檢測試劑盒 英文名稱:OMD ELISA Kit, 英文縮寫:OMD,
真菌/酵母NADP依賴性甘油醛-3-磷酸脫氫酶(NADP-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase;NADP-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
Ⅲ型前膠原羧基端原肽(PⅢCP)elisa檢測試劑盒 英文名稱:PⅢCP ELISA Kit, 英文縮寫:PⅢCP,
人抗嗜中性粒細(xì)胞胞漿抗體(ANCA)elisa檢測試劑盒 英文名稱:ANCA ELISA Kit, 英文縮寫:ANCA,
胍基丁胺脲水解酶/凝集酶(AGMAT)elisa檢測試劑盒 英文名稱:AGMAT ELISA Kit, 英文縮寫:AGMAT,
含卷曲螺旋域蛋白80(CCDC80)elisa檢測試劑盒 英文名稱:CCDC80 ELISA Kit, 英文縮寫:CCDC80,
單核白細(xì)胞/淋巴細(xì)胞分離試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:0次
真菌/酵母細(xì)胞線粒體DNA萃取試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:0/20次
飲料三氯蔗糖(sucralose)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
突觸融合蛋白0(STX0)elisa檢測試劑盒 英文名稱:STX0 ELISA Kit, 英文縮寫:STX0,
3(KLK3)elisa檢測試劑盒 英文名稱:KLK3 ELISA Kit, 英文縮寫:KLK3,
操作步驟:
柱式 miRNA PAGE 膠回收試劑盒50 次說明書切取含有目的DNA 片段的瓊脂糖凝膠條帶。
● 盡量切除不含有目的DNA 部分的凝膠,減少凝膠體積,提高DNA 回收率。
● 切膠時,請使用長波長UV (360 nm )光盒。且不要將DNA 長時間暴露在紫外燈下,以防DNA 損傷。
2 稱取凝膠的重量近似地確定其體積。
● 凝膠重量的稱量方法:取.5 ml 離心管電子天平稱初質(zhì)量,切膠裝在離心管后稱終質(zhì)量,兩者差即為膠的質(zhì)量。不同離心管的重量可能有差異,因此,每個離心管的重量需單獨稱量。
3 按照每00 mg 瓊脂糖凝膠對應(yīng)00 µl 溶液BD 的比例,向離心管中加入溶液BD。
4 50 ℃水浴7-0min,直至凝膠*溶化。期間需要振蕩混合3 次。
● 瓊脂糖必須*融化,以免堵塞柱子,嚴(yán)重影響DNA 段的回收效率。
● 如果總體積大于500 µl,可適當(dāng)增加溶膠時間。
● 若此時溶液變紅,可加0 µl 3M NaAC (pH 5.2)。
5 將步驟4 所獲溶液置于DNA 純化柱中,靜置2min 。
● 膠塊*溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱,因為純化柱在較高溫度時結(jié)合DNA 的能力較弱。
6 2,000 rpm 離心min。若溶液量大于DNA 純化柱的容積,可分兩次離心,棄濾液。
● 此時DNA 被吸附于DNA 純化柱中的硅膠膜上。
7 加入500 µl 溶液BD。2,000 rpm, 離心min,棄濾液
8 加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm, 離心min,棄濾液。
● 溶液PE 初次使用前用無水乙醇按: 4 稀釋,即含80% 乙醇。
● 此步驟的作用是將硅膠膜上吸附的蛋白、鹽等雜質(zhì)洗脫,以獲得高質(zhì)量DNA 段。
9 加入500 µl 溶液PE。2,000 rpm, 離心min,棄濾液。
0 2,000 rpm 離心 3min ,以*去除純化柱中的液體。
● 此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時也利于DNA 段的充分溶解。
將離心柱置于新的.5 ml 離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-00 µl 溶液Eluent (60℃預(yù)熱),靜置2min 。2,000 rpm 離心min,管底即為目的DNA 段。貯存于-20℃。
● 溶液Eluent 可用無菌雙蒸水代替,但其pH 需為8.0-8.5,加入體積視DNA 目的段的多少、用戶對目的濃度要求而定。
● 對溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會提高提取DNA 目的段的產(chǎn)量。
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